Dorothee Tsalos-Gruhle studierte Gesang an den Musikhochschulen Karlsruhe (Diplom-Gesangspädagogik) und Köln (Künstlerisches Aufbaustudium). Sie konzertierte im In- und Ausland mit namhaften Dirigenten und war Ensemblemitglied am Staatstheater Braunschweig. Anschließend erhielt sie ein Opernstipendium des European Opera Centre Manchester.
Seit 2009 unterrichtet sie Gesang und Stimmbildung beim Ulmer Spatzen Chor an der Musikschule Ulm.